考博生化和分子生物学复习笔记-第32章

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互补　RNA　链，再冷却，可形成　DNA/RNA杂交分子　E。溶液粘度增加　答案：D　考点：DNA的变性、复性和杂交　解析：DNA变性时是双链之间的氢键被解开，而核苷酸链并不断裂，DNA降解才是核苷酸　链断裂成寡核苷酸或单核苷酸，且变性时吸光值上升，本来核酸是高分子，粘度很大，变性　后粘度不会增加。

　　　
十四、DNA的共价键包括下列哪几种键（）（1990北医）　A。连在脱氧核糖　C…1′上的腺嘌呤以　β…糖苷键相连　B。3′…5′磷酸二酯键　C。磷酸—核糖的　5′…OH的酯键　D。磷酸——核糖　2′…OH的酯键　答案：A、B、C　考点：DNA的分子结构组成及其化学键　解析：DNA共价键指DNA一级结构中的各种化学键A、B、C都是但D不对，因DNA是　脱氧核糖核苷酸，其核糖2′位上无…OH而是…H。　十五、从组织提取酶时，最理想的结果是（）（1991北医）　A。蛋白质的产量最多，酶单位数最大　B。酶单位数最大，比活力最高　C。需要补充的辅酶量最大　D。Km　值最低　E。比活力最高　答案：B　考点：酶的活力测定及其活力的含义。　解析：提取酶时，酶含量常用酶活力表示：即在1分钟内转化1umol底物所需的酶量为一　个单位，而每毫克酶蛋白所具有的酶活力，称比活力。对同一种酶来说，比活力越高，表明　酶愈纯，提取酶时，最理想的结果是酶量多，纯度高，所以也就是酶活力单位最大，比活力　最高。　十六、测定蛋白质分子量的方法（）（1991北医）　A。盐析　B。SDS…聚丙烯酰胺凝胶电泳　C。紫外分光光度法　D。超速离心　答案：B、D　考点：蛋白质的分离纯化常用的几种方法的应用　解析：A只可分离纯化蛋白质，但是不能测定分子量，C。可测蛋白质含量，B、D都是利用　蛋白质分子量的差异分离纯化蛋白质的方法，故可用于测定蛋白质分子量。　十七、丙二酸对于琥珀酸脱氢酶的影响属于（）（2000北医）　A。反馈抑制B。作用物抑制　C。竞争性抑制D。非竞争性抑制　E。反竞争性抑制　答案：C　考点：抑制剂对酶促反应速度的影响　解析；丙二酸与琥珀酸结构相似，其与酶的亲和力远大于琥珀酸与酶的亲和力，其对琥珀酸　脱氢酶的抑制作用是竞争性抑制的典型实例。　十八、同工酶（）（2000北医）　A。催化的化学反应相同　B。酶蛋白的分子结构相同　C。酶蛋白的理化性质相同D。电泳行为相同　E。Km值相同　答案：A　考点：同工酶的定义、性质

　　　

解析：同工酶分子结构、理化性质、Km值皆不同，但催化同一化学反应　十九、不直接参与维系蛋白质三级结构的化学键是（）（2000北医）　A。氢键B。盐键　C。疏水键D。二硫键　E。肽键　答案：E　考点：蛋白质各级结构中主要的化学键。　解析：肽键是蛋白质一级结构的主要化学键，直接维系三级结构的是各种次级键——氢键、　盐键、疏水键、二硫键，其中疏水键是主要的键。　二十、用高聚脱氧胸苷酸纤维素（oligo…dT纤维素）分离纯化mRMA的层析方法称（）（1994　北医）　A。离子交换层析　B。排阻层析　C。亲和层析　D。反相层析　E。高效液相层析　答案：C　考点：层析技术的类别及原理　解析：层析是利用各组分理化性质的不同，使各组分以不同程度分布在两相中，当流动相流　过固定相时，各组分以不同速度移动，而达到分离，根据两相相互作用的原理的不同分为不　同的类型：如离子交换层析是指流动相可与固定相因带电荷性质不同而结合，而亲和层析是　指流动相与固定相具有专一而又可逆的亲和力而使生物分子分离，本题中oligo…dT纤维素　可与mRNA的多聚腺苷酸尾碱基配对结合，故属亲和层析。　填空　一、在假尿苷中，碱基和核糖是以键相连的（1995北医）　答案：杂环上的C…5与糖环的C…1′　考点：tRNA分子和稀有碱基　解析：要记住　tRNA　转录后加工各种稀有碱基的生成原理，如一般的嘧啶核苷是以杂环上　N…1　与糖环的C…1′连成糖苷键，这正是与假尿嘧啶核苷的区别。　二、别构酶都含有和两种结构或亚基（1995北医）　答案：调节部位催化部位　考点：别构酶的定义、结构　解析：酶的两种最主要的活性调节方式：变构调节与共价修饰调节，要记住相应的调节原理　三、可以按蛋白质的分子量、电荷及构象分离蛋白质的方法是（1995北医）　答案：电泳　考点：蛋白质的性质及分离纯化方法　解析：蛋白质分离纯化方法是蛋白质一章中很重要的部分，最好结合蛋白质的理化性质来记　忆，因为其分离纯化采用的方法是由其相应的性质决定的。　四、位于酶活性中心的必需基团有和（1995北医）　答案：催化基团和结合基团　考点：酶的分子结构　解析：酶的活性中心结构要记住，因为这是酶发生催化作用的基础，也便于对酶促反应机制　的理解。　五、蛋白质变性时，其溶液粘度溶解度（1999北医）　答案：增加，降低　考点：蛋白质的理化性质

　　　
解析：蛋白质变性主要发生二硫键和非共价键的破坏，变性后其理化性质改变，生物活性丧　失。　六、反竞争性抑制物存在时，酶反应动力学特点，Km（1999北医）　答案：降低、减小　考点：抑制剂对酶促反应速度的影响　解析：竞争性抑制Km增大Vm不变　非竞争性抑制Km不变Vm降低　反竞争性抑制Km减小Vm降低　七、目前常用的蛋白质序列分析法有和，可直接测量蛋白质分子空间结构的方法是（1996　北医）　答案：多肽链氨基酸序列分析，快速DNA序列分析，X射线晶体衍射法　考点：蛋白质一级结构和空间结构的测定　解析；蛋白质一级结构测定方法中，通过氨基酸的自动连续切除和鉴定是常用的方法，但不　是唯一的办法，还可以先分离编码蛋白质的基因，再测定DNA序列，按照三联密码原则推　断出氨基酸序列。两项技术还可以补充互用。　八、实验测得　Tyr　的　pK1＝2。20，pK2＝9。11，pKR＝10。07，Tyr　的　pI　应为。（1996　北医）　答案：5。66　考点：氨基酸等电点的计算　解析：写出Tyr（酪氨酸）的电离式，可以看出其兼性离子两边的pK值分别是pK1、pK2与　pKR　无关，故其pI＝1〖〗2（pK1＋pK2）＝1〖〗2（2。20＋9。11）＝5。66　九、琥珀酸脱氢酶的竞争性抑制剂为和。（1996北医）　答案：丙二酸、戊二酸　考点：抑制剂对酶促反应速度的影响　解析：丙二酸、戊二酸与琥珀酸结构类似，所以可以与琥珀酸竞争酶的结合部位，发挥竞争　性抑制的作用。　十、蛋白质和核酸对紫外光均有吸收，蛋白质的最大吸收波长为nm，核酸是nm（2000北　医）　答案：280、260　考点：蛋白质、核酸的理化性质　解析：蛋白质最大吸收峰是因其含有酪氨酸、色氨酸残基，核酸是因其嘌呤、嘧啶环中有共　轭双键。　十一、蛋白质变性时一级结构不变，蛋白质一级结构是指氨基酸的排列顺序而言（1992）　十二、Km值是指酶促反应速度达最大反应速度一半时的底物浓度（1990）　十三、酶结构的调节包括变构调节和共价修饰调节（1994）　十四、就化学本质而言，酶原的激活过程就是酶的活性中心形成或暴露的过程（1993）　十五、一定条件下，核酸分子　Tm　值的大小与　G＋C　含量和核酸分子大小及变性条件有关　（1997）　考题分析　问答：　一、奇数碳原子长链脂肪酸经β氧化原产生多个乙酰CoA和一分子丙酰CoA，请以中文物　质名称及箭头图写出丙酰　CoA　的彻底氧化途径（不含水的生成过程），标出脱氢、脱羧反应　步骤所需要的酶的名称，并计算ATP生成数量。（1999年　北医）　考点：丙酰CoA的氧化代谢过程

　　　
热点：机体内一些途径中的中间代谢产物要彻底氧化，往往要经过三羧酶循环、糖异生、氧　化磷酸化多种过程，这就需要将每个过程及其与别的代谢途径之间的联系搞清楚，且要记住　三羧酸循环的中间产物不能直接在循环中被氧化成　CO２和　H2O，如苹果酸必须循糖异生　途径转化为丙酮酸，才能在线粒体中被氧化。　由上述看出1分子丙酰CoA生成2分子FADH２4分子NADH＋H＋，及直接生成2分子　ATP　所以彻底氧化生成ATP数量为2×2＋4×3＋2=18分子ATP　二、若肝中含有大量6…磷酸葡萄糖，试述其主要去路。（1996，1997）　考点：糖代谢中重要中间产物的代谢方式。　解析：1。在葡萄糖…6…磷酸酶作用下生成糖。　2。转化为　1…磷酸葡萄糖，再合成糖原。　3。循糖分解代谢途径进行酵解或有氧氧化。　4。循磷酸戊糖途径生成　5…磷酸核糖和NADPH，也可再进一步生成　3…磷酸甘油醛转化为甘　油　三、甘油如何氧化成　CO２和　H2O？以中文物质名称及箭头图写出其氧化途径（不含水的生　成过程）并计算ATP生成量（1999北医）　考点：甘油氧化代谢过程，甘油既可异生成糖，也可氧化分解，本题是考查其后一过程　ATP　计算：从丙酮酸到氧化成　CO２和H2O共生成15分子ATP（计算略）　从甘油到丙酮酸：共生成　2　分子　NADH＋H＋，2　分子　ATP，消耗　1　分子　ATP，故此过程　ATP　量为　2×2＋2…1=5　或　2×3＋2…1=7　分子　ATP（1　分子　NADH＋H＋不同方式穿梭至线　粒体，可生成2分子或3分子ATP）　所以甘油彻底氧化，1分子生成ATP量为20分子或22分子ATP　四、体内脂肪酸可否转变为葡萄糖，为什么（1999，北医）　考点：糖、脂、蛋白质代谢的相互联系　解析：脂肪酸分解成乙酰CoA，要转变为糖乙酰CoA首先应变成丙酮酸，但糖分解代谢过　程中，丙酮酸至乙酰CoA这步反应为不可逆反应，故乙酰CoA不能朝糖异生的方向进行，　脂肪酸也就不能转变为葡萄糖　五、写出下列物质中文名称，生成过程及生理意义1。SAM2。PAPS（2000，北医）　考点：含硫氨基酸的代谢　解析：1。SAM：S…腺苷甲硫氨酸，生成：甲硫氨酸＋ATP腺苷转移酶SAM　生理意义：是活性甲基的供体，可通过转甲基作用生成多种含甲基的重要生理活性物质，如　肾上腺素、肌酸、肉毒碱等。　2。PAPS：3′…磷酸腺苷…5′…磷酸硫酸　生成过程：半胱氨酸脱去巯基和氨基，生成H2S，H２S氧化成H2SO４　ATP＋SO4２　腺苷…5′——磷酸硫酸＋ATPPAPS　生理意义：PAPS性质较活泼，可与某些物质形成硫酸酯，这在肝生物转化中有重要意义，　一些物质形成硫酸酯被灭活，使其毒性降低，另一些物质形成硫酸酯，水溶性增加，可排出　体外，也能起到灭活及解毒作用。此外，PAPS可参与硫酸角质素及硫酸软骨素等分子中硫　酸化氨基糖的合成。　六、葡萄糖能变成脂肪吗？脂肪能变成葡萄糖吗？若能，写出简要反应过程（中文），若不能说　明理由（2000北医）　考点：物质代谢之间的联系


　　　
解析：　因乙酰CoA不能逆行生成丙酮酸循糖异生途径生成葡萄糖　所以糖异生通路被阻断，脂肪酸不能生成糖，所以虽然脂肪分解的甘油可转变为葡萄糖，但　与脂肪酸生成的乙酰CoA比是微不足道的，所以葡萄糖可以转化为脂肪，而脂肪大部分不　能转化为葡萄糖，糖供应不足时，可以靠脂肪供能，却不能靠其升高血糖。　七、试述核苷酸的生物学功能。（1996，北医）　考点：核苷酸的功能　解析：1。多个核苷酸相连合成核酸，这是核苷酸最主要的功能。2。体内能量的利用形式，如　ATP、GTP、UTP　等。3。参与代谢和生理调节，如　cAMP　是体内重要的第二信使，参与细　胞信号转导，从而调节代谢。