考博生化和分子生物学复习笔记-第31章
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Ala…Lys…Ala…Ala…Phe…Ala 九、磷酸酶、磷酸化酶、激酶、蛋白激酶有何区别？各举一例（1994北医） 考点：对酶定义的理解 解析：磷酸酶是将酶或蛋白质上磷酸基水解下来的酶，如磷蛋白磷酸酶可将磷酸化的糖原合 酶上的磷酸基水解掉使其恢复活性。 磷酸化酶是将某一物质水解并将其磷酸化的酶，如糖原磷酸化酶是在糖原分解过程中从糖链 上水解掉葡萄糖生成1…磷酸葡萄糖的酶。 激酶包括多种，能将 ATP 磷酸基转移给接受体的反应都由激酶催化，如己糖激酶即可催化 葡萄糖生成6…磷酸葡萄糖。 蛋白激酶也是激酶的一种，它多是在酶活性调节中发挥作用，将酶的丝氨酸、苏氨酸等残基 磷酸化，发挥共价修饰作用，使其活性升高或降低，如蛋白激酶 A 可将糖原合成酶磷酸化 使其失去活性。 十、从以下几方面对蛋白质及DNA进行比较（1999北医）
（1）分子组成（2）一、二级结构（3）主要生理功能 十一、叙述tRNA一、二级结构要点及其与当前已知的分子结构与功能的关系（1999北医） 考点：tRNA的分子结构与功能 解析：tRNA一级结构：由核糖核苷酸通过磷酸二酯键连成的单链分子 二级结构：核苷酸链中存在着一些局部互补配对的区域，可以形成局部双链，进而形成一种 发夹结构，局部配对的双链构成茎状，中间不配对的部分膨出成环状，故其二级结构成三叶 草形，左右两侧稀有碱基环称二氢尿嘧啶环和假尿嘧啶环，位于下方的称反密码环，此环中 间3个碱基即为反密码子，3′端为CCA…OH末端。 与分子功能的关系：tRNA功能是在细胞蛋白质合成过程中作为各种氨基酸的载体并将其转 呈给 mRNA，具体来说靠其 3′末端 CCA…OH 与氨基酸结合成氨基酰…tRNA，反密码子与 mRNA上的密码子形成碱基互补，蛋白质生物合成时靠反密码子辨认 mRNA上密码子，然 后携带密码子编码的氨基酸至核蛋白体，参与蛋白质合成。 十二、（1）何谓酶蛋白、辅酶、活性部位？它们在酶催化反应中起何作用？ （2）何谓竞争性抑制？就酶反应动力学有关参数指出它与非竞争性抑制的区别（1999 北医） 考点：酶的分子结构及功能，抑制剂对酶促反应速度的影响 解析：（1）酶分单纯酶、结合酶，后者由蛋白质和非蛋白质部分组成，其中的蛋白质部分即 为酶蛋白。非蛋白质部分中与酶蛋白结合疏松，可用透析等方法除去的称辅酶，酶分子中必 需基团空间结构上相互靠近，组成具有特定空间结构的区域，这一区域称酶活性中心。 酶蛋白决定反应特异性，辅酶决定反应种类与性质，活性中心包括催化基团和结合基团，能 与底物结合，并催化底物发生化学反应将其转变为产物。 （2）与底物结构相似，可与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶与底物结合的即为竞争性抑 制剂它能使反应Vmax不变Km值变大，故这种抑制作用可通过增加底物浓度来消除，非 竞争性抑制剂使反应 Vmax 降低，Km 不变，其与酶活性中心外的必需基团结合，不影响 酶与底物的结合，故 Km 值不变，因抑制剂与底物之间无竞争关系，故此抑制作用不能通 过增加底物浓度来消除。 十三、测定酶活性时，对底物浓度有何要求，为什么（1991北医） 考点：酶活性测定的条件 解析：测定酶活性时，首先底物的量要足够，以使酶被充分饱和，获取最高反应速度，充分 反映待测酶的活力，但底物量也不能过多，以 20～100Km 为宜，过高的底物浓度有时反 会对酶有抑制作用，这是因为同一酶分子上同时结合几个作用物分子，使酶分子的诸多必需 基团不能针对一个作用物分子进行催化攻击。 十四、简要说明，设计一个定量测定胰液中脂肪酶活性的方法需要考虑哪些因素（1995 北 医） 考点：酶活性的测定 热点：因为在生物组织中，酶蛋白含量甚微，所以我们要确定酶量的多寡主要是测定酶活性， 即在规定的实验条件下，测定该酶催化反应的速度，用单位时间内底物的消耗或产物的生成 量表示，因而测定过程中，要保持一定的实验条件，这就是酶活性测定中最重要的内容。 解析：许多因素可影响酶促反应速度，故要测胰液中脂肪酶活性需要考虑如下因素，使各种 因素相对恒定： ①酶的样品应作适当的处理； ②底物的量要足够，使酶被充分饱和，以充分反映待测酶活力； ③应保持酶足够的浓度； ④根据反应时间选择最适反应温度；
⑤根据不同底物、缓冲液选择最适pH值； ⑥反应体系中应有适当的辅助因子、激活剂，除去抑制剂； ⑦可以终止反应或有连续监测装置能追踪反应过程 自测题及模拟训练题 选择： 一、胰蛋白酶主要水解（）（1995北医） A。赖氨酸或精氨酸的羧基组成的肽键 B。氨基末端肽键 C。芳香族氨基酸残基组成的肽键 D。中性脂肪族氨基酸组成的肽键 E。羧基末端肽键 答案：A 考点：多肽链中氨基酸序列分析常用的酶 解析：蛋白质进行氨基酸序列分析除了应知道其基本步骤外，还应知道每一步基本原理及其 中用到的试剂或酶，这些酶作用位点的区别，如：胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸羧基侧的 肽键，溴化氰水解甲硫氨酸羧基侧的肽键；测定氨基末端常用的试剂为二硝基氟苯，丹磺酰 氯，测定羧基末端氨基酸常用羧肽酶，Edman降解法测氨基酸排列顺序用的是异硫氰酸苯 酯。 二、维持球蛋白三级结构稳定的最重要的键或作用力是（）（1995北医） A。二硫键 B。盐键 C。氢键D。范德华力 E。疏水键 答案：E 考点：维持蛋白质结构的化学键 解析：维持蛋白质一级结构的主要是肽键，二级结构主要是氢键，三级和四级结构靠次级键 维持，这其中最主要的是疏水作用，疏水键、盐键、氢键、范德华力、二硫键都参与三级结 构的形成，要区分这些化学键的含义：蛋白质中众多疏水基团之间的作用力即为疏水键；酸 性和碱性氨基酸可带电荷，正负电荷相互作用形成盐键；与氢共用电子对形成的键为氢键； 半胱氨酸之间可以二硫键结合。 三、下列关于蛋白质的叙述，哪一项不正确（）（1995北医） A。蛋白质的糖基化或磷酸化可影响蛋白质的构象 B。β—片层的形成需要二硫键 C。加入硫酸铵可使溶液中蛋白质变性 D。有些蛋白质可以两种不同构象存在 E。肽键的部分双键特性对蛋白质的二级结构形成极为重要 答案：B 考点：蛋白质的空间结构组成 解析：首先要明确构象与构型的区别，一般来说构型改变需要涉及共价键的断裂与生成，而 构象的改变无需共价键破坏，只需单键的旋转和非共价键改变就可形成新的构象，蛋白质中 共价键常指的是肽键，蛋白质的变构调节和共价修饰都可引起构象改变，故A、D是正确的， 其次要记住蛋白质各级结构中主要的化学键，象 β 片层二级结构之间主要是氢键，所以 B 是错的，肽键的部分双键特性对形成肽单元是重要的，对二级结构的形成也是重要的。 四、某种酶的活性需要解离的异吡唑基和巯基，当底物含赖氨酸残基时，为了与酶结合， 氨基必须带正电荷，此反应最适 pH 是（）（注各基团 pk 值①异吡唑基＝6②巯基＝8③氨
基＝10。5） A。5B 。6C 。7D。8E。9（1996北医） 答案：E 考点：蛋白质的两性电离，酶最适pH值。 解析：此反应最适pH值要满足两个条件：①酶的异吡唑基与巯基要处于解离状态②底物的 氨基必须带正电荷，即三个基团都要处于解离状态，对…NH2来说要解离，pH 应小于其 pk 值，H＋才会与…NH2 结合为…NH＋3 对…SH 来说要解离，pH 值应大于其 pK 值，故最 适pH值至少应大于8，小于10。5选E。 五、已知某种酶的 Km 值为 0。05mol/l，试问要使此酶催化的反应速度达最大反应速度的 80％，底物浓度应是多少？（）（1996 北医） A。0。04 mol/lB。0。08mol/lC。0。02mol/lD。0。05mol/lE。0。20mol/l 答案：E 考点：米氏方程的理解和应用 解析：米氏方程V＝Vmax［S］ Km＋［S］ 对同一酶与底物，同样的反应环境，Vmax， 〖〗 ， Km 是一定值，故 V 只与［S］有关，所以可将题中条件代入公式得 80％Vmax＝Vmax ［S］ 0。05＋［S］→［S］＝0。2mol/l。 〖〗 六、下列关于B…DNA双螺旋结构模型的叙述中哪一项是错误的（）（1997北医） A。两股链方向相反 B。两链通过碱基之间的氢键相连 C。为右手螺旋，每个螺旋为 10 个碱基对 D。碱基位于螺旋外侧 E。螺旋直径为 2nm 答案：D 考点：DNA的二级结构 解析：B…DNA即我们通常所说的Watson…Crick模型结构，其碱基位于螺旋内侧，核糖和 磷酸基骨架才位于外侧。
七、在核酸中占9…11％，可用于计算核酸含量的元素是（）（1997北医） A。CB。OC。ND。HE。P 答案：E 考点：核酸的化学组成 解析：正如 N 在蛋白质中含量稳定一样，P 在核酸中含量较多且较恒定，可以通过测定样 品中P的含量对核酸进行定量分析。
八、下列对活化能的描述哪项是恰当的（）（1997北医） A。随温度而改变 B。是底物和产物能量水平的差值 C。酶降低反应活化能的程度与一般催化剂相同 D。是底物分子从初态转变到过渡态所需要的能量 答案：D 考点：酶的催化原理 解析：酶就是通过降低反应活化能而增加反应速度的，且比一般催化剂更有效地降低活化能。 九、下列哪种试剂可使蛋白质的二硫键打开（）（1996北医） A。溴化氰 B。碘乙醇 C。2，4…二硝基氟苯
D。三氯醋酸 E。β…巯基乙醇 答案：E 考点：蛋白质序列测定中拆开二硫键的方法 解析：拆开二硫键的方法有两类：过甲酸氧化法和巯基化合物还原法。后者常用的试剂为β巯基乙醇、二硫苏糖醇。 十、多肽链中主链骨架的组成是（）（1996北医） A。…NCCNNCCNNCCNBNHCONHCONHC。…CHNOCHNOCHNODOHCNOHCNOH答案：B 考点：肽键的组成 解析：多肽链是通过氨基酸相连成肽键而构成的。故其骨架组成为前一氨基酸的羧基脱…OH 与后一氨基酸的氨基脱氢，然后二者以酰胺键相连，即肽键组成为CONH。 十一、细菌核糖体RNA中的大亚基由以下物质组成（）（1996北医） A。5SrRNA、18SrRNA、5。8SrRNA 和49种蛋白质 B。5SrRNA、28SrRNA、5。8SrRNA和49种蛋白质 C。5SrRNA、23SrRNA和 21 种蛋白质 D。5SrRNA、23SrRNA 和31 种蛋白质 E。5SrRNA、16SrRNA和31 种蛋白质 答案：D 考点：核蛋白体的结构 解析：这是记忆性的内容，记住原核、真核生物在核蛋白体组成上的区别就可作答。 十二、试选出胰蛋白酶原激活的正确形式（）（1996北医） A。蛋白激酶水解掉酶原分子上的4 肽 B。胰蛋的酶水解掉酶原分子上的4 肽 C。肠激酶水解掉酶原分子上的 6 肽 D。胰蛋白酶水解掉酶原分子上的8 肽 答案：C 考点：酶活性的调节中酶原的激活 解析：酶原的激活是调节酶活性的重要方式，多是在酶的作用下水解掉一个或几个短肽，转 化成相应的酶。 十三、DNA受热变性时（）（1998北医） A。在 260nm 处的吸光度下降 B。多核苷酸链断裂成寡核苷酸链 C。碱基对可形成氢键 D。加入互补 RNA 链，再冷却，可形成 DNA/RNA杂交分子 E。溶液粘度增加 答案：D 考点：DNA的变性、复性和杂交 解析�
