考博生化和分子生物学复习笔记-第28章
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8。 DNA复制时一条链的合成方向与复制叉转移方向相反。是 非
9。 氨基酸的代谢总是先脱去氨基。是 非
10。构成糖蛋白的糖肽连接键；简称为糖肽键。以丝氨酸；苏氨酸和酪氨酸的羟基为连接点；形成…O…糖苷键型。是 非
填空题（每1空格0。5分）总分25
1。蛋白质的一级结构就是（ ）；二级结构是指（ ）的空间关系；三级结构是指（ ）的空间关系；四级结构是指（ ）。
蛋白质中的每一条肽链称为（ ）；另一有用术语是（ ）
2。胰岛素原经（ ）水解；除去（ ）得有活性的胰岛素。
3。该糖名称（ ）；由（ ）与（ ）通过（ ）（ ）糖苷键连接组成。
4。所有DNA中的腺嘌呤与胸腺嘧啶的摩尔含量（ ）；鸟嘌呤与胞嘧啶的摩尔含量（ ）。因此；嘌呤的总含量与嘧啶的总含量（
）。不同生物种的DNA具有（ ）碱基组成。DNA的碱基组成没有（ ）特异性。（ ）（ ）和（ ）都不影响DNA的碱基组成。
5。蛋白质的生物学功能是蛋白质分子的（ ）所具有的性质。蛋白质受到（ ）因素的作用时；引起生物活性的（ ）；（
）以及其它的物理化学常数的改变；这种变化称为蛋白质的（ ）。其实质是由于维持高级结构的（ ）遭到破坏而造成的（ ）的解体；但未涉及（
）的破裂。
6。根据核酸的物化性质开展了一系列研究核酸的重要方法。 核酸在（ ）nm区有一紫外吸收峰；峰尖在（
）nm左右。利用这一特性；可用分光光度计定量测定核酸（ ）和定性鉴定核酸（ ）。
7。三羧酸循环是在细胞的（ ）中进行的。首先酵解产物（ ）在（ ）存在下氧化脱羧变成（ ）；再与三羧酸循环中的（
）缩合成柠檬酸。柠檬酸（ ）成顺乌头酸。乌头酸经（ ）及（ ）作用依次变成异柠檬酸及（ ）。这4种酸都含有3个羧基；故称为三羧酸循环。
8。分离蛋白质化合物的各种方法主要经过根据蛋白质在溶液中的下列性质：1）（ ）；2）（ ）；3）（ ）；4）（ ）；5）（ ）。
9。DNA的复制是一个（ ）的过程；即子代分子的（ ）亲代；（ ）是新合成的。这个复制特点保证了遗传信息的（ ）。
问答题（每题10分）20分
进行酶活力测定时应当注意什么 为什么测定酶活力时以测定初速度为宜；并且底物浓度应大大地超过酶浓度
DNA重组技术包括那些步骤 有那些应用价值
中国科学院微生物研究所2001年博士研究生入学考试分子生物学试题（注：请将答案写在答题纸上；答在考卷上无效）简答题（每题5分；共40分）
试述PCR反应的基本原理和操作过程。
为什么PITG能诱导Lac Operon表达
分子伴侣帮助新生肽正确折叠的分子机制是什么
PBR322和pUC质粒使用了相同类型的复制子；但前者在宿主细胞内只有15…20拷贝；而后者可高达500…700拷贝。为什么
DNA复制时的岗崎片段是怎样产生的
如果已知细胞中有3个基因（proA；proB和proC）参与脯氨酸的生物合成；那么；proA＋ proB＋ proC＋与pro＋有何不同
你能写出具有proA＋ proB… proC＋的基因型吗
为什么原核生物基因表达主要在转录水平上受调控
请说说σ因子及其功能。
祥答题（每题12分；共60分）
9。你以经可克隆得到一个编码60kDa蛋白A的
cDNA相互补的mRNA；但它编码了一个62。5kDa的蛋白质B；该蛋白能够被蛋白A的抗体所识别。你知道这一发现有什么意义吗
10。你手中有一个cDNA克隆；如何才能克隆到其5'上游区的序列呢
11。有两个基因在同一转录信号的刺激下得到表达；合成两个蛋白质。在移去转录信号后；其中一个蛋白的合成速率并没有发生太大的变化；而另一蛋白质的合成几乎停止了。请解释。
12。你知道拟南芥基因组中共有多少条染色体 大概有多少个ORF
在不知道某个生物基因组全序列时；科学家是根据哪些原则来推测该生物单倍体细胞中所含有的ORF总数的
13。科学家常用分子间相互作用技术来研究不同蛋白质之间的关系。简单说明该技术的操作原理。
中国科学院微生物研究所 2001年博士研究生入学考试生物化学试题 （注：请将答案写在答题纸上；答在考卷上无效）
2000年诺贝尔生理学/医学奖获得者为Carlsson A；Greengard 和Pkandel E三人；试简要说明三人各自所做出的主要贡献。（10分）
何谓酶的活性中心 简述酶活性中心的特点；举例说明研究酶活性中心的主要方法。 （15分）
什么是核酶（ribozyme）和抗体酶（abzyme） 它们和酶有什么不同 （10分）
有一种蛋白质；在某组织内含量低；很难分离提取。现已知其分子量；并已得到该蛋白质的抗体。问用哪些实验方法可以初步证实组织内的确含该蛋白质 （5分）
从高等生物基因中克隆的完整基因为什么在大肠杆菌中不能正确表达
动物氧化葡萄糖要经过哪些重要途径 氧化1摩尔葡萄糖可以净化多少摩尔ATP （15分）
今有含下列性质蛋白质的混合物；（A）分子量12；000；pI=10； （B）分子量62；000；pI=4；
（C）分子量28；000；pI=7；
（D）分子量9；000；pI=5。若不考虑其他因素；当它们（1）流经DEAE—纤维素交换柱；用线性盐梯度洗脱时；（2）流经Sephadex
G—50凝胶柱时；这些蛋白质的洗脱顺序如何 （4分）
今从一种罕见的真菌中分离到一个八肽；它具有防止秃发的作用。经分析；它的氨基酸组成是Lys2 ；Asp1；；Tyr1
；Phe1；Gly1；；Ser1；Ala1。此八肽与FDNB反应并用酸水解后；释放出DNP…Glp将它用胰蛋白酶酶解后；则得到氨基酸组成为：
Lys1；Ala1；Ser1和Gly1；；Phe1；Lys1两个三肽；还有一个2肽。将它与胰凝乳蛋白酶反应后；释放出游离的Asp；1个四肽和1个三肽；四肽的氨基酸组成是：Lys1；Ser1；Phe1和Ala1；三肽与FDNB反应后；再用酸分解；释放出DNP…Gly。试问这八肽的氨基酸顺序是什么
（6分）
填空题（共30个空；每空1分；共30分）
糖肽连接键的主要类型有————和————。
大多数多肽激素是通过激活靶细胞中___________酶；增加__________的合成；从而激活_________________。
Southern印迹法；Northern
印迹法和Western印迹法分别用于研究______________；_______________和_______________转移和鉴定的常规技术。
研究蛋白质的体外翻译最常用的有动物的_____________和植物的__________等两种无细胞翻译体系。
蛋白质分子的二级结构和三级结构之间还经常存在两种结构组合体称谓_____________和_____________；他们都可充当蛋白质三级结构的组合配件。
用偶联酶的方法测酶活性时；辅助酶的量要_______________待测酶的量 。
在原核细胞中；DNA复制时；RNA起_____________作用；DNA聚合酶起_____________作用。
转录时；RNA聚合酶能识别DNA摸板上特定的序列；该部位被称作___________。
〃依整DNA的DNA聚合酶〃即DNA复制酶〃依赖DNA的RNA聚合酶〃叫____________________；〃依赖RNA的DNA聚合酶〃称_________________。
核苷三磷酸在代谢中起重要作用。_________________是能量和磷酸基团转移的物质；_________________参与单糖的转变和多糖的合成；______________参与卵磷脂的合成；__________________供给肽链合时所需的能量。
用PCR方法扩增DNA片段；在反应中除了用DNA片段作为模板外；尚需加入______________；____________和______________。
哺乳动物的必需脂肪酸为_______________和_____________。
糖酵解过程在细胞的__________________中进行；三羧酸循环在细胞的_______________中进行。
中国科学院微生物研究所2001年博士研究生入学考试生物化学（B）试题（注：请将答案写在答题纸上；答在考卷上无效）
写出下列英文符号的全称（共5分）
1。SDS—PAGE 2。cDNA 3。PCR 4。RAPD 5。HPLC
是非题：请分析下列说法是否正确；若不正确；请改正（共7分）。
蛋白质变性是肽链从卷曲到伸展的过程。
DNA变性是天然双链DNA分子被解开成单链的过程。
组成蛋白质分子的各种肽链称为亚基。
具有生物催化活性的物质是蛋白质。
填空题（共68分）
以下14种氨基酸Cys。 Val。 Tyr。 Ile。 His。 Pro。 Phe。 Asn。 Leu。 Thr。 Lys。 Trp。
Ser。 Met。
的单子符号依次是在280nm处产生光吸收的氨基酸是…；；酸水解时会遭破坏的氨基酸是___________；在糖蛋白中与糖分子形O—糖苷键的氨基酸是____________；_____________；形成N—糖苷键的氨基酸是___________；在蛋白质结构中；形成二硫键的氨基酸是__________；造成β—转角的氨基酸是________；人体必需的氨基酸是____________；_________；_________；________；__________；__________；____________；__________。
DNA主要存在于_____________；它是由基本结构单位_________通过________连接而成；其二级结构模型为_________；在此模型中；维系结构稳定的三种主要力量是___________；___________；__________。
人体细胞有_________对染色体。根据2000年6月科学家公布的人类基因组草图基本信息；人类基因组由__________亿个碱基对组成；含____________万个基因；其中编码蛋白质的基因占__________％。
RNA可分为三大类①_________功能是________；②_______功能是________③_____功能是___________。
生物膜的主要化学组分是_________；_________；二者通过_________键结合成复合体；现今普遍认为的膜结构模型是__________。
生物氧化是在___________进行；是细胞摄取_________通过_________作用释放出_____________的过程。
线粒体上电子传递链的组成是_________；___________；___________。
分解代谢提供给一个细胞的主要产品是__________；_________；_________。
维生素的功能作用是___________。
10。蛋白质分离纯化中；根据蛋白质分子大小的方法有___________；__________；___________等；根据蛋白质电荷不同的方法有_________；___________。
11。重组DNA技术中常用的工具酶有①____________主要用途是_________；②_____主要用途是_________；③___________主要用途是__________；④___________主要用途是____________。
解释下列名词（共20分） 酶的初始反应速度 别构酶 反馈抑制
中科院2003生化考博题
1。详述原核与真核生物基因在转录水平表达调控？
2。近年真核生物基因表达调控新进展？
3。四种分析蛋白质纯度方法原理？
4。七种重组体筛选方法，原理？
5。包含体？
6。一支痢疾杆菌和一支小鼠细胞株。如何分离出他们的二氢叶酸还原酶基因。
7。蛋白质一、二、三、四结构？用什么方法测定。
8。从cDNA文库中用特定一对引物利用PCR扩增一个酶蛋白基因。将该基因重组到一个通用表达载体上进行表达。对经过纯化的酶蛋白进行活性测定表明，重组蛋白具有相应酶活性。是否可以认为有关蛋白质基因表达纯化工作是否完成？为什么
中国农业大学2001年博士生入学考试动物生物化学试题
1、试述血红蛋白的结构特点，血液中的氧分压、二氧化碳浓度、氢离子浓度对其与氧结合的调节作用？；血红蛋白和肌红蛋白的相同和区别？
2、 如何保证蛋白质翻译的忠实性？ 3、 肉毒碱在脂肪代谢中的生理功能？
4、 名词解释（16个）：如：蛋白质变性、增色效应、磷酸果�
