中外科学家发明家丛书:巴斯德-第5章
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写道:“请允许我借此机会向您表示衷心感谢,您通过杰出的研究证明了腐
烂因子的理论的正确性,给我提供了唯一的、使我能让防腐方法取得好结果
的基础。”
法国学者们对李斯特的杀菌法持不关心态度,所以,巴斯德在医学研究
院对外科医生提出忠告:“外科用的器具于使用前,必须放在火焰中烧烤,
如果用显微镜检查外科使用的器具,可以看到上面有小沟和孔穴,里面积满
了尘埃,无论如何小心刷洗,都没法清除,如果放在火焰中烧灼,就可以完
全杀死尘埃中的微生物了。”用这种极为简单的方法,可预防伤口的感染。
后来李斯特的杀菌法在法国也得以提倡推广。
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普法战争中战败的法国实行了共和政体。1874年,巴斯德获得政府颁发
的国民议会的国民奖;政府每年给予巴斯德12000法朗的年金,如他去世,
他的妻子也可享受一半,以表彰他对养蚕业和酿酒业做出的贡献。
1876年,巴斯德被任命为法国的代表,前往意大利的米兰出席国际养蚕
会议。会议之余,巴斯德参观了米兰附近的大型养蚕场。在入口的大门上,
高挂着欢迎巴斯德教授的横幅标语,表示了当地养蚕人对巴斯德的敬意。
八、拯救牛羊
回到巴黎的巴斯德,开始着手在当时成为重要问题的炭疽病的研究。
炭疽病是牛、羊、马等牲畜易患的可怕的疾病。患这种疾病的牲畜,刚
刚还好好的,突然颤抖,鼻口流血而死亡,而且死亡率极高,从发病到死亡
为时极短。这种病在法国和俄国都有流行。法国受害最为严重的是厄尔卢瓦
尔省和夏尔特尔省一带。每年都有很多牛、羊因患这种病而死亡,年损失达
2000万法郎。法国农业部长委托巴斯德研究炭疽病在羊群中爆发的原因,找
出预防和治疗的方法。巴斯德觉得他有责任拯救牛、羊,于是转向炭疽病的
研究。
巴斯德从病羊的血液中找到了引起炭疽病的是炭疽杆菌。对炭疽杆菌病
原的研究证明:炭疽杆菌与引起败血症的弧菌不同,毒性来自炭疽杆菌的芽
孢。
炭疽杆菌芽孢是怎样使牛羊发病的呢?巴斯德做了一个试验。他在饲料
中加入炭疽杆菌芽孢喂羊,结果这些羊没有感染上炭疽病。他又在饲料中加
带刺的植物,如蓟属植物或大麦穗,羊在吃饲料时带刺的植物可以刺破舌头
或喉头,结果,这些羊感染了炭疽病死去。巴斯德找到了炭疽杆菌芽孢感染
的渠道,他建议:在埋有死于炭疽病动物尸体或炭疽杆菌芽孢多的地方,必
须防止羊群吃带刺的植物。
至于那些深埋在土壤中的炭疽杆菌怎么又会重返地面的呢?巴斯德一直
思考这个问题,但始终找不到答案。有一天,巴斯德在圣·热尔曼农场看到
一块泥土的颜色与附近其他土地的颜色不同。有一堆蚯蚓翻起来的土粒。这
里的农场主告诉巴斯德,去年死于炭疽病的羊就埋在这块地里。巴斯德把从
这块地里捉到的蚯蚓带回去研究,他发现蚯蚓肠道中的土粒带有炭疽杆菌的
芽孢。根据观察,巴斯德提出:土中深处的炭疽杆菌牙孢,是由于蚯蚓的活
动把它们翻到地表面上来的。这是使羊群感染炭疽杆菌的途径。多么可怕的
掘墓人!
如何预防羊群感染炭疽病?这是巴斯德要解决的重要问题。巴斯德和他
的助手用鸡汁培养基在42—43℃温度下培养炭疽杆菌。在这一温度培养,炭
疽杆菌只能生长繁殖,而不能形成芽孢。培养6、8、10、12、15天后,分别
测定它们的毒力。原来在常温下培养的菌液可以致死10头绵羊,培养8天后
的菌液只能使4—5头绵羊致死,培养10天或12天后的菌液便不能使绵羊致
死,而只是表现出轻微的症状。将减了毒的炭疽杆菌放在常温下培养,形成
的芽孢再萌发成细胞后,仍是毒力很弱的炭疽杆菌。这样在一系列的减毒炭
疽杆菌中,可以检验出使绵羊、牛、马只表现轻微症状的杆菌。
1880年,巴斯德宣布炭疽病人工免疫取得了重大进展。兽医H·罗西尼
奥建议默隆农学会邀请巴斯德将新免疫法进行公开实验。1881年4月底,巴
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斯德与农学会协商好进行公开试验,并由罗西尼奥进行安排。农学会提供了
50头绵羊。按照计划,其中的25头用减毒炭疽杆菌菌液进行两次免疫接种,
间隔12—15天。几天之后,免疫的和未免疫的绵羊,同时接种毒力强的炭疽
杆菌菌液。
5月5日,巴斯德在普伊—福特农场进行了一个伟大的试验。大批人群
——医生、兽医、药剂师、农民——参加了这次试验。巴斯德的助手鲁和尚
贝朗对25头绵羊5头奶牛进行第一次免疫接种,并分别作了记号。接种后的
第一天到第四天,经常测量免疫动物的体温,没有发现任何异常现象。5月
17日,进行第二次免疫接种,其毒力比第一次强些。接种后,绵羊和奶牛没
有发生死亡现象。5月31日,对所有实验动物接种了毒力强的菌液。6月4
日,检查时发现,未进行免疫接种的绵羊耷拉着头,不愿吃草。进行过免疫
接种的绵羊中,有几头体温升高,其中一头体温升到40℃,另有一头有轻度
水肿,这一组试验的绵羊除一头外,食欲正常。全部试验结束时未经免疫的
绵羊死了22头。有2头正在咽气,还有一头表现出典型炭疽病的症状;免疫
过的一组绵羊全都健康,没有发病。罗西尼奥检验了2头死的绵羊,显微镜
下看到血液中含有大量的炭疽杆菌。免疫过的奶牛没有异常表现,未免疫的
奶牛表现出严重的水肿。
普伊一福特农场的公开试验引起了极大的轰动。巴斯德向法国科学院报
告了试验的结果。一年之内,厄尔卢瓦地区给8万只羊注射了疫苗。与同一
时期相比,羊的死亡率从9%下降到0。65%;牛的死亡率从7%下降到0。24
%。1882年底,炭疽杆菌疫苗在德国开始应用。到了1894年,疫苗已免疫
了340万头羊和43。8万头牛,总有效率在99%,死亡率为0。3%—1%。
九、预防鸡霍乱和猪霍乱
1878年,在巴斯德思考如何使牲畜不感染炭疽病的时候,有人请巴斯德
去研究一种鸡病——鸡霍乱。患病的鸡不吃食,整天无精打采,耷拉下脑袋
和翅膀,眼睛闭着,拉稀,混身出血,没两天就死了。
巴斯德对死于鸡霍乱的鸡血进行研究。他通过连续性分离血中的微生
物,得到了纯的菌种。这种微生物的形状象个“8”字。这种微生物在鸡汤培
养基中的繁殖能力是惊人的,与弧菌完全不同。这种微生物的毒力很大,在
面包屑上滴上很小的一滴,就可以使一只鸡死去。鸡吃了带菌食物,经过肠
道感染上鸡霍乱。所以鸡的肠道是这种微生物良好的培养基。病鸡的粪便成
了传染的病源。现在我们知道了巴斯德发现的这种微生物是败血巴斯德杆
菌。
巴斯德把引起鸡霍乱的微生物找到了,他就把它培养起来,让它繁殖;
然后把它注射到正常的鸡身上,看它会不会也引起鸡霍乱;如果鸡得了病,
还会在这只鸡的身体内,找到同样的微生物。
巴斯德和他的助手把病鸡的一滴血放在肉汤里。再把它放在暖箱里去培
养;第二天的同一时间,取出一滴培养液,放到另一瓶新鲜培养液里,再放
在暖箱中继续培养。与此同时他们每天用新鲜培养液给鸡接种,成功地诱发
了鸡霍乱,观察鸡霍乱病的情况。
这年夏天,巴斯德正在紧张研究鸡霍乱的时候,接到家里的来信,信中
说他的女儿已经订婚,就要结婚了。巴斯德心中十分高兴,决定回去给女儿
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办婚事。他向助手鲁和尚贝朗交代了工作以后,就回家去了。
两位助手按照巴斯德吩咐,天天接种一次新培养液,给鸡注射一次,记
录鸡的患病情况。有一天,两位助手决定去度假。他们把一瓶鸡霍乱的肉汤
培养液放在碗柜里,锁上实验室的门就去了。过了些日子,巴斯德和助手们
都回来了。尚贝朗取出碗柜里的鸡霍乱培养液给一只鸡注射了。第二天,意
外的事情出现了,这只鸡竟然没有发病,仍然活蹦乱跳地活着。
两位助手商量了这件事:看来那瓶培养液过期了,我们还是到鸡场去要
一只病鸡,重新培养新鲜的鸡霍乱菌吧。这件事可不能让巴斯德老师知道。
他们知道巴斯德老师严格认真,一丝不苟,这件事要是让老师知道了,非吃
一顿批评不可。他们决定“保密”。
他们制成了新鲜鸡霍乱菌的培养液。第二天,他们用新制的培养液,给
一些鸡注射了。惊人的事情发生了。所有的鸡都象往常一样,得病死亡,只
有一只例外!经过仔细核对,正是那只注射过“无效”的过期培养液的鸡。
“这是怎么回事呢?”巴斯德问助手。两位助手低下了头。尚贝朗把事
情的经过如实地说了出来,请求老师处罚他们。巴斯德没说什么,低头沉思。
他没有责备两位助手。突然,巴斯德跳了起来,喊道:“我明白了,那只鸡
有抵抗力,所以它没有死。把这瓶培养液留下来,不能倒掉!”
巴斯德仔细地思考着过期的鸡霍乱菌为什么会使鸡有免疫力——也就是
不得病,有抵抗力。他又从患有鸡霍乱的病鸡血中重新分离,培养出病原菌,
并买来一批鸡做试验。鉴于上次试验的结果,他把未感染病的和新买的鸡分
成四组。新鸡和老鸡两组都注射新制成的的培养液,另两组分别注射保存的
培养液和新制成的培养液。试验的结果是:注射过保存培养液的鸡群,抵抗
住了新制的培养液中病原菌的攻击;与此相反的试验组,鸡都患病死了。
这次试验结果同假期归来后试验结果为什么不同呢?巴斯德想,除去培
养液放置时间长外,也许还有别的什么原因。经过反复试验和验证,巴斯德
发现,如果让培养液长期暴露在空气中,鸡霍乱菌就会失去致病的能力,其
毒力减弱了。用减毒病原菌注射后的鸡,产生了对强毒病原菌抵抗的能力。
巴斯德继续研究引起病原菌毒力减弱的原因。他发现这与两次传代培养
间隔时间长短有关,间隔的时间越长,减毒程度就越大。他刊登在《医学科
学院学报》上第一篇探讨鸡霍乱病文章说,鸡霍乱也能以毒力减弱的状态存
在,它能诱发病症,但不造成死亡,用减毒病原菌注射的动物复原后,即使
用强毒的病原菌接种,也能存活下来。巴斯德把减毒的鸡霍乱菌株称为“疫
苗”,这个名词一直沿用到今天